在生物医疗检测中,样本内源性抗体类物质(如类风湿因子RF、抗人鼠免疫球蛋白HAMA及异嗜性抗体等)可能对检测流程产生干扰,导致临床结果出现错误。为了解决这个问题,主动添加合适的阻断剂能够有效消除内源性物质引起的干扰,从而降低假阳性或假阴性的发生率,并显著提升检测系统的准确性、灵敏度与稳定性。
主动阻断剂含有与干扰抗体具有高亲和力的成分,能够主动结合干扰抗体,从而阻止其与检测抗体或捕获抗体的结合。相比之下,被动阻断剂通常为动物IgG,通过与检测系统抗体竞争结合干扰抗体来降低干扰,需要以较高浓度使用以提高竞争效果。复合型阻断剂则通过化学交联的方法,将单体IgG转化为大分子聚合物,从而有效利用空间位阻效应增强阻断效果。
此外,IgG/RF吸附剂能够与血清中的IgG形成免疫复合物,借助与变性IgG相似的结构吸附RF,从而显著提升IgM检测的灵敏度和特异性。
关于阻断剂的使用建议,首先,阻断剂的最终工作浓度应通过梯度实验来确定。首次使用时建议从较高浓度开始,确认效果后再进行梯度稀释,以选择更合适且经济的使用浓度。其次,阻断剂应尽可能早地接触样本,并保持较长的作用时间。对于免疫侧向层析法,建议将阻断剂加入标记物垫或样品垫的处理液中;而在酶免试剂盒或化学发光试剂盒中,则应加入磁珠液或酶标液中;免疫比浊产品则建议加入R1工作液。
在条件允许的情况下,建议测试多种阻断剂,以找到合适的产品。由于检测目标及系统的多样性,当单一阻断剂不能完全满足需求时,组合使用将提供更佳效果。实验结果显示,协同组合能够呈现更理想的效果。
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