一、试验原理:本实验旨在分离和检测真菌。所用培养基中,脑心浸粉、胰酪蛋白胨以及蛋白胨提供丰富的氮源,维生素和矿物质元素;葡萄糖则为微生物提供必要的碳源;氯化钠用于维持渗透压的平衡;而磷酸氢二钠则是作为缓冲剂,帮助稳定培养环境;琼脂则是培养基的凝固成分。
二、培养基配方(g/L):脑心浸粉100g、胰酪蛋白胨25g、蛋白胨70g、葡萄糖210g、氯化钠25g、磷酸氢二钠125g、琼脂150g,pH值调整至7.0±0.2,培养温度为25℃。
三、试验方法:
1. 称取590g的培养基成分,加热并搅拌,使其完全溶解于1000ml的蒸馏水中,随后在121℃下高压灭菌15分钟,备用。
2. 制备好的平板应保存在2-8℃的环境中,避免直接光照。干燥的培养基应存放于阴暗干燥处,并保持在室温下。
3. 使用前,将制备的平板放置于室温下10-20分钟以达到适宜的温度。
4. 准备质控菌液。
5. 选择适当稀释度的质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每个稀释度下均接种两个平板。
6. 在23-28℃下倒置培养基,培养48-72小时,记录实验结果。
四、结果观察与解释:
接种以下质控菌株后,在23-28℃下,倒置培养基培养48-72小时,观察结果如下:
- 质控菌株:白色念珠菌,编号CMCC(F)9800,接种量(CFU)为10^0到10^2,使用沙氏葡萄糖琼脂定量培养法,质控评定标准PR≥0.7,特征为白色菌落。
- 质控菌株:黑曲霉菌,编号CMCC(F)9803,接种量(CFU)为10^0到10^2,质控评定标准PR≥0.7,特征为有黑色孢子。
- 质控菌株:酵母菌,编号CMCC(F)9802,接种量(CFU)为10^0到10^2,质控评定标准PR≥0.7,特征为白色菌落。
备注:为增强培养基的选择性,每升培养基中可添加0.05g氯霉素和0.5g放线菌素。通过这样的方法,确保了实验的准确性和有效性,为生物医疗领域提供了可靠的实验依据。尊龙凯时-人生就是博,秉承严谨的科学精神,为生物医疗研究贡献力量。